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宿迁鸿畅浅谈聚丙烯酰胺凝胶配制制备过程_河南鸿畅化工有限公司销售部

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宿迁鸿畅浅谈聚丙烯酰胺凝胶配制制备过程

单价: 面议
起订: 1 吨
供货总量: 100 吨
发货期限: 自买家付款之日起 5 天内发货
所在地: 河南 郑州市
有效期至: 2019-08-31 [已过期]
最后更新: 2021-12-04 13:40
浏览次数: 18
 
宿迁鸿畅浅谈聚丙烯酰胺凝胶配制制备过程 详细说明
鸿畅化工浅谈聚丙烯酰胺凝胶配制制备过程:
1、 按要求装配好垂直电泳板,两块玻璃板的两侧及底部用1%的琼脂糖封边,防止封闭不严而使聚丙烯酰胺液漏出。
2、 将装好的玻璃电泳板倾斜成45~60℃角。
3、 按表3配制所需%浓度凝胶的毫升数。
4、 加入TEMED后,立即混匀,缓缓倒入两玻璃板间的胶床中,直到液体接近溢出时为止。
5、 立即插入适当的梳子,密切注意防止梳齿下产生气泡,用一有力的夹将梳子夹在一边的玻璃板上,然后将玻璃板斜靠在物体上,使成10°角,可减少液体泄漏的机会。
6、 室温聚合一小时后,将玻璃板插入电泳槽中,上紧,倒入*缓冲液。
7、 小心取出梳子,加样。
原理:在SSCP测定中,双链DNA(dsDNA)被变性成为单链DNA(ssDNA),每一条单链DNA都基于它们的内部序列而呈现出一种独有的折叠构象,即使同样长度的DNA单链因其碱基顺序不同、甚至单个碱基的不同会形成不同的构象。这些单链DNA在非变性条件下,用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,单链DNA的迁移率和带型,都取决于其折叠构象和电泳时的温度。
SSCP与变性凝胶电泳基本一致,不同之处有以下几点:
a. SSCP使用非变性凝胶进行电泳,即在凝胶配制中不加入变性剂。我室常用8%非变性胶(丙烯酰胺 80g,N- N,-亚甲双丙烯酰胺 * g,10×TBE 50ml,加水定容到1L)
b. 工作环境,由于SSCP受温度影响,所以在电泳过程中应防止温度的升高,所以电泳环境为电压400V,电流50mA,单板电泳功率为9W,不用预热。缓冲液最好用新配制的。
c. 由于电泳功率较低,所以电泳时间较长,通常需要10小时以上,因此一般电泳需要过夜。室温在25。C以下。

宿迁鸿畅浅谈聚丙烯酰胺凝胶配制制备过程河南鸿畅化工有限公司销售部的主要产品,我们的产品负责人是张女士,有需要的朋友请直接拨打我的电话18538055221,我们的地址是河南省巩义市芝田工业区,期待与您的合作!
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